蛋白质定性

Label-free 蛋白质组分析技术

Label-free，即非标记定量技术，是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析，它克服了传统的同位素标记的缺点，即过高的样品浓度, 并且前处理少，更多保留样本最原始信息；对于低丰度多肽的覆盖程度更高；不受标记试剂盒限制，可进行大批量的样本检测。

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研究流程

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样本要求

• 常规动物组织≥ 70mg
• 常规植物组织≥ 300mg
• 微生物≥ 80 μL
• 细胞≥ 30 μL
• 纯蛋白≥30µg
• 血清/血浆≥ 450µL
• 尿液≥ 7.5ml
• 唾液、泪液≥ 1 mL
• 脑脊液≥ 450µL
• 淋巴液、关节液、穿刺液≥ 4.5ml

• FFPE石蜡包埋切片（每片厚度10 μm，面积1.5×2 cm）≥15片
• 外泌体≥ 50μL

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分析结果

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案例分析

肌萎缩侧索硬化症脑脊液巨噬细胞生物标志物 Cerebrospinal Fluid Macrophage bBiomarkers in Amyotrophic Lateral Sclerosis

发表期刊：Annals of Neurology       影响因子：9.037 发表日期：2018年       发表单位：英国牛津大学临床神经科学系

研究背景

神经退行性疾病肌萎缩侧索硬化症 (ALS) 是一种涉及多种分子途径的异质性临床综合征。

研究结果

3种巨噬细胞来源的几丁质酶在ALS中含量增加：几丁糖苷酶(CHIT1)、几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1) 和几丁质酶-3样蛋白2(CHI3L2)。

结论

CHI3L1 升高是 ALS 和 PLS 的共同特征，而 CHIT1 和 CHI3L2 水平不同。几丁质酶水平与疾病进展率相关 CHIT1、CHI3L1 和 CHI3L2 水平与磷酸化神经丝重链相关。在低初始水平的人群中，CHI3L1 水平随时间增加，但 CHIT1或 CHI3L2 水平不随时间增加。CHIT1 值高与生存期缩短相关。

参考文献

Thompson A G ,Gray E ,Marie-Laëtitia Thézénas, et al. Cerebrospinal fluid macrophage biomarkers in amyotrophic lateral sclerosis[J]. Annals of Neurology, 2018, 83(2)